在长江流域棉区，红铃虫是一种非常重要的寡食性害虫，在自然条件下一般只危害棉花的蕾、花和铃，给当地的棉花生产造成了严重的损失。调查表明，在转Bt基因棉花种植以前，由红铃虫危害造成的经济损失一般为10%～30%左右．而在转Bt基因棉大面积推广种植以后，红铃虫对棉花的危害显著下降，但由此而引起的红铃虫对转Bt基因棉抗性的发展受到了广泛关注。因此，有必要就红铃虫对crylAc蛋白的抗性遗传规律进行研究，在进行该项研究之前首先要掌握红铃虫的室内人工饲养技术。关于红铃虫人工饲料的配方及室内饲养技术国外已有大量报道，并且相关技术非常成熟。在国内，陆伊文于1980年首次报道了应用棉子粉加蛋白质饲料作为红铃虫的人工饲料，成功饲养了600多头幼虫，由于饲料中含有红铃虫的天然寄主成分，取材相对困难，故无法将该技术进行大规模的应用。束春娥和李文谷等将该技术进行了改进，用麦胚饲料饲养红铃虫，连续饲养了上万头幼虫，但该技术尚未被运用。至此，在国内仍无法实现室内长期饲养红铃虫。从2003年起，我们开始了红铃虫人工饲料配方及饲养技术的研究，目前用人工饲料已连续饲养了30代以上。
1、材料与方法
1.1供试虫源
2003年将采自湖北省潜江县棉田的红铃虫老熟幼虫带回室内，置于29±loC．L:D=14:10 h，相对湿度为60%的条件下打破滞育。待红铃虫老熟幼虫化蛹后，将蛹拣于一端用细纱密封、直径为15 cm的圆柱形产卵罐中，同时向产卵罐投入5%的蜂蜜水以供羽化后的成虫取食。一旦成虫开始羽化，即将滤纸置于产卵罐的细纱上，用重物压住以用于卵的收集。待产卵开始后，每天揭下有卵的滤纸，放入干净的罐头瓶内孵化，同时在产卵罐盖上新的滤纸。
1.2饲料组成
本试验所用的麦胚饲料主要依据Adkisson等的配方改进而来。饲料组成：麦胚（南京面粉厂），大麦和黄豆（湖北省农科院粮食作物研究所），百花蜂蜜（湖北大华蜂业有限公司），福临门玉米油（东海粮油工业张家港有限公司），啤酒酵母（湖北安琪酵母股份有限公司），琼脂（福建省莆田市秀屿区平海琼脂厂），干酪素（北京奥博星生物技术有限责任公司），a-纤维素和尼泊金（西陇化工有限公司），蔗糖、山梨酸钾、苯甲酸和苯甲酸钠（北京化学试剂公司），泛酸钙（天津市博迪化工有限公司），烟酸（上海蓝季科技发展有限公司），核黄素（天津市化学试剂公司分公司），盐酸吡乡辛（天津市化学试剂公司分公司），硫胺素盐酸盐（上海崇明裕西厂），氯化胆碱（上海三爱思试剂有限公司），抗坏血酸（天津市科密欧化学试剂有限公司），生物素（浙江康普达生物科技有限公司）和维生素B12（浙江康普达生物科技有限公司）。
1.3饲料配方
试验设4个配方：A．麦胚+干酪素+山梨酸钾+尼泊金；B，大麦+干酪素+山梨酸钾+尼泊金；C，麦胚+黄豆粉+山梨酸钾+尼泊金；D，麦胚+防腐剂+苯甲酸+苯甲酸钠（表2）。配置方法：先用电子天平准确称量各种固体配料，然后将琼脂溶解在足够的水中加热至沸腾，其余固体成分在烧杯中充分混匀并加入玉米油、蜂蜜再次混匀，最后将溶化好的琼脂加入混合物中搅拌均匀。
1.4接虫
将配好的饲料切成萝卜条状（约4 g），装入长75 mm、内径20 mm的养虫管内，用精致毛刷接入红铃虫初孵幼虫，每管接1头，用干净、灭菌棉塞塞紧，以防幼虫逃走。然后放置在29±l℃、L:D=14:10h．相对湿度60%的条件下饲养。饲养过程中如发现个别管内饲料干枯，可用镊子补充一小块新鲜饲料，幼虫即可继续取食成长[2]。每个配方接虫50头，重复3次。每个试管标号，每天观察记录以确定幼虫每一个生长阶段的历期。
2、结果与分析
2.1 4种饲料配方饲养红铃虫的结果
从表3可以看出，以B配方的红铃虫幼虫成活率最高，达68.10%；D配方成活率最低，只有24.70%。A、B两配方的幼虫存活率无显著差异，但极显著地高于C、D两配方。对不同处理的平均幼虫期分析表明，取食A配方的幼虫期最短，为18.57 d、取食B配方的最长，为49.29 d。不同处理之间幼虫的平均历期具有极显著差异(P．(0.01)。在蛹重和蛹期方面，以A配方的蛹重最高，为0.02 g，显著高于其他处理(P<0.05)；D配方的蛹期最短，为10.09 d，与A配方无显著差异，但低于其他处理。成虫性比差异很小，均接近1:1。羽化率稳定在80%以上。
2.2 A配方饲料连续饲养红铃虫的结果
麦胚饲料连续饲养红铃虫的结果列于表4。从表中可知，1～4代连续饲养的幼虫成活率逐渐提高，至第4代时已超过75%。从幼虫期、蛹期和产卵量看，第3代与第4代幼虫期差异不显著（P>0.05）。不同代别间蛹期和成虫产卵量无显著差异(P>0.05)。从性比和羽化率看，差异都不大，性比维持在1:1左右，羽化率最高为95.27%，最低为87.55%（表4）。
2.3不同饲料饲养红铃虫的结果比较
从表5可知，F4代饲养与田间采集、Adkisson饲养比较，除单雌产卵量(70.6粒)较高外，其余3项均相差不大。另外，Adkisson饲养的成活率可达到81%，我们目前最高存活率也已达到了75%以上。
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3、讨论
目前用麦胚饲料饲养红铃虫虽然效果较好，但是大批量饲养时昂贵的麦胚酪元饲料将成为限制因素。如果以大麦及黄豆粉分别代替麦胚和酪元饲养红铃虫，效果并不理想。而以黄豆粉替代纯酪元是目前国外饲料配方之一。在Miller1996年报道中，其配方以黄豆粉为主要成分，幼虫生长情况良好。因此我们有必要进一步摸索。
在防腐剂的选择方面，避免使用福尔马林，以克服饲料中福尔马林的刺激气味。我们选择了尼泊金、山梨酸钾和苯甲酸、苯甲酸钠两组进行比较，结果D配方的存活率低，主要是由于饲料发霉所致，可见防腐剂的种类对防腐效果有一定影响。从目前的情况来看，以A配方饲养的红铃虫幼虫在连续饲养4代后，幼虫成活率基本稳定在70%以上，而且幼虫生长发育整齐，化蛹集中，成虫发育正常，基本可以满足室内试验的需要。
